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¿Cómo operar un micrótomo?

¿Cómo operar un micrótomo?


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En la imagen de arriba (Fuente: Amazon.com, United Scientific MCT001 Hand Microtome) podemos ver un micrótomo. ¿Cómo se opera?


El instrumento se muestra aquí al revés. Si se le da la vuelta, se ve así:

Los discos de vidrio se colocan alrededor del tubo central. El principio de funcionamiento se puede ver en esta imagen:

La muestra se coloca en el tubo en el medio y se empuja hacia afuera girando la perilla en la parte inferior. El incremento mínimo para este tipo de micrótomo es de 10 micrómetros. La navaja se utiliza para cortar las rodajas de la muestra. Puede encontrar un manual de funcionamiento aquí.


Además, ¿se siguen utilizando en la investigación biológica diaria? ¿Enseñado para estudiantes?

Es un microtomo de mano, está bien. Como explicó Chris, estos se utilizan para seccionar láminas delgadas de tejido vegetal, que se examinarán con un microscopio de luz transmitida. Todavía están disponibles en varias fuentes, por ejemplo, de Euromex en los Países Bajos. Todavía tengo uno de esos, pero hace años que lo usé:

Esos ya casi no se usan en la investigación, pero todavía los usan biólogos / botánicos / microscopistas aficionados.

Los únicos usos que puedo imaginar en la investigación serían usarlo para seccionar una muestra para ver si es lo suficientemente interesante como para ser procesada y seccionada utilizando técnicas más contemporáneas, como la incrustación en parafina seguida de un trineo giratorio / trineo / base. microtomía. O quizás en el estudio de los procesos de la vida.

Dependiendo de las habilidades del operador (¡incluidas sus habilidades para afilar / afilar sus cuchillos!) Y la naturaleza de la muestra, se pueden seccionar rebanadas tan delgadas como 20 µm, utilizando un micrótomo de mano.

Suele ser lo suficientemente delgada como para hacer un portaobjetos botánico más o menos aceptable, temporal o permanente, pero como una especie de norma, las secciones "regulares" de parafina botánica / histológica / histopatológica / ... para microscopía óptica se seccionan en estos días en cualquier grosor entre 2 - 10 µm.

Eso no es posible con este tipo de micrótomo.

La imposibilidad de seccionar muestras con un grosor lo suficientemente delgado como para obtener imágenes microscópicas realmente claras ha agobiado a los científicos durante siglos.

No fue hasta 1883 que un mecánico estadounidense, Adam Pfeiffer, ideó una máquina utilizable para que eso sucediera. Pfeiffer trabajó más en la idea proporcionada por otros dos, Cowles y Richards, que hicieron un primer prototipo en 1879.

En 1886, Charles Minot, también estadounidense, ideó el primer micrótomo rotatorio realmente utilizable.

Ese "microtomo Minot" es hasta el día de hoy, el caballo de batalla en el laboratorio botánico, histológico e histopatológico.

Es una historia interesante, pero el micrótomo rotatorio se basa en un concepto fundamentalmente diferente, en comparación con un micrótomo de mano.

La verdadera descendencia del microtomo de mano es el microtomo de trineo (base), ya que imita más o menos los movimientos de un operador que utiliza un microtomo de mano. Pero sin todas esas variables imposibles de controlar.

Este es un microtomo de trineo base, terminé de restaurar hace solo unas semanas. Es el legendario Jung Heidelberg Tetrander II. El Tetrander se comercializó en 1910 y algunos de ellos todavía están en uso. Sirven para seccionar muestras grandes y duras (madera dura, hueso, dientes,…), que no se pueden seccionar con un micrótomo rotativo.

En el momento en que apareció en el mercado, una broma popular entre los histotécnicos alemanes era que se llamaba "Tetrander" porque se necesitaban cuatro hombres para manejarlo ... En realidad, se llamaba "Tetrander" porque fue diseñado por cuatro científicos alemanes, entre ellos el legendario Paul Mayer (sí, el tipo de la solución de tinción hemalum de Mayer).

Éste (está operativo) es capaz de seccionar muestras de hasta aproximadamente 5 cm x 7 cm (aprox. 2 pulgadas x 3 pulgadas), con un grosor de sección ajustable entre 1 y 50 µm.

Los modelos motorizados más grandes son capaces de seccionar cosas con tanta fuerza como un bloque de hormigón, con el tamaño de un árbol modesto. Y eso no es exageración ...


Cómo utilizar un microscopio óptico

Bess Ruff, MA es coautor (a) de este artículo. Bess Ruff es estudiante de doctorado en Geografía en la Universidad Estatal de Florida. Recibió su Maestría en Ciencias Ambientales y Gestión de la Universidad de California, Santa Bárbara en 2016. Ha realizado trabajos de encuesta para proyectos de planificación espacial marina en el Caribe y ha brindado apoyo a la investigación como becaria de posgrado para el Grupo de Pesca Sostenible.

Hay 9 referencias citadas en este artículo, que se pueden encontrar en la parte inferior de la página.

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Tanto los científicos como los amantes de la ciencia utilizan microscopios de luz para magnificar pequeñas muestras como las bacterias. Son menos potentes que otras alternativas como los microscopios electrónicos, pero también mucho más baratos y prácticos para un uso casual. Al enfocar la luz en sus lentes, le permiten examinar las construcciones celulares más pequeñas que componen las muestras. ¡Pero primero, debe configurar un portaobjetos y ajustar la luz y el enfoque de su microscopio!


Aprender sobre las partes del microscopio le proporciona un marco de referencias. Puede utilizar los términos correctos para comunicarse con otros científicos o estudiantes.

Esto es crucial al dar instrucciones. Si es un instructor, debe tomarse el tiempo para enseñar a los estudiantes sobre las diferentes partes de un microscopio para que pueda dar instrucciones detalladas sobre cómo preparar un microscopio y usarlo de manera segura.

Conocer los términos correctos para las diferentes partes de un microscopio también lo ayudará a solucionar problemas. Podrá buscar información sobre una parte específica en la que tenga problemas y averiguar cómo rectificar el problema.


¿Cómo se usa un microscopio en biología?

Establecer su microscopio sobre una superficie plana y tome una muestra que le gustaría mirar. Pon tu muestra en un microscopio diapositiva, que es un rectángulo de vidrio que contiene su muestra. La diapositiva encaja en el escenario del microscopio y se sujeta con clips. Una luz brillará a través de la imagen.

  1. Conecte su microscopio óptico a una toma de corriente.
  2. Gire el revólver portaobjetivos hacia el objetivo de menor potencia.
  3. Coloque una cubierta de vidrio o un cubreobjetos sobre su muestra.
  4. Monte su muestra en el escenario con sus clips de metal.
  5. Gire la perilla de enfoque / perilla de ajuste aproximado hasta que la lente del objetivo se deslice sobre la diapositiva.

De manera similar, se pregunta, ¿qué es el microscopio en biología?

A microscopio es un dispositivo que permite a las personas ver muestras en detalle demasiado pequeñas para que las vean a simple vista. Lo hacen mediante aumento y resolución. Microscopios son especialmente útiles en biología, donde muchos biólogos estudian organismos demasiado pequeños para verlos sin ayuda.

¿Cuál es el uso del microscopio?

A microscopio (del griego antiguo: & mu & iota & kappa & rho & # 972 & sigmaf, mikr & oacutes, "pequeño" y & sigma & kappa & omicron & pi & epsilon? & nu, skope & icircn, "mirar" o "ver") es un instrumento utilizado para ver objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. Microscopía es la ciencia de investigar pequeños objetos y estructuras utilizando tal instrumento.


ACTIVIDAD 2: Cómo usar su microscopio

Ampliación de microscopio: agrandamiento de un objeto y apariencia rsquos

El aumento es = (potencia de los oculares) multiplicado por (potencia de los objetivos)

Nuestros microscopios tienen oculares 10X y objetivos 4X, 10X, 40X y 100X

¡Nunca lleve un microscopio con una sola mano!

ENFOQUE:

1. Utilice uno de los portaobjetos bacterianos prefabricados y teñidos con Gram.

2. Asegúrese de que el condensador esté completamente hacia arriba y que el diafragma de iris esté completamente abierto, permitiendo que la máxima cantidad de luz entre en contacto con su diafragma.

3. SIEMPRE comience en 4X, el escenario bajado, enfoque con la perilla de enfoque grueso primero.

4. Una vez enfocado, muévase a 10X y enfoque usando el multa perilla de enfoque.

5. Una vez enfocado, muévase a 40X y enfoque usando el multa perilla de enfoque.

6. Mueva los objetivos a la mitad entre 40X y 100X, agregue 1 gota de aceite.

7. ¡ASEGÚRESE DE QUE EL 40X NO TOQUE EL ACEITE!

8. Muévase a 100x y DESPACIO enfoque con la perilla de enfoque fino Si no ve su imagen con claridad, NO Vuelve al 40X e intenta volver a enfocar.

LIMPIEZA DE UN MICROSCOPIO:

2. Retire la diapositiva, apague la alimentación.

3. Limpie el aceite de todas las superficies y 100X con papel para lentes.

4. Con la segunda hoja de papel para lentes, humedecida con alcohol, limpie todas las superficies. Nunca use Kimwipes para limpiar el microscopio.

5. Limpie las superficies con una nueva hoja seca de papel para lentes.

6. Regrese a la lente más baja (4x).

Una vez que esté listo, invite al instructor para sus primeras pruebas de habilidad.

PRUEBA DE HABILIDAD # 1 (2.5 PTS): MICROScopio DE ENFOQUE

Bajo la supervisión del instructor o técnico de laboratorio, enfoca tu diapositiva por debajo de 100X. Puede usar sus notas, libros, etc. pero NO PUEDE obtener ayuda de otros estudiantes.

PRUEBA DE HABILIDAD # 2 (2.5 pts): Limpiar su microscopio

Bajo la supervisión del instructor o técnico de laboratorio, limpie su microscopio. Puede usar sus notas, libros, etc. pero NO PUEDE obtener ayuda de otros estudiantes.

POR FAVOR LEA LO SIGUIENTE ANTES DE CONTINUAR:

Stentors son un género de organismos eucariotas unicelulares con cilios. Suelen tener forma de cuerno y se encuentran entre los organismos unicelulares más grandes conocidos. Se reproducen asexualmente mediante fisión binaria y se encuentran en la mayoría de los lagos y arroyos de agua dulce.

Paramecia son un género de organismos eucariotas unicelulares con cilios. Suelen tener forma ovalada y fueron algunos de los primeros microorganismos estudiados al microscopio. Se reproducen asexualmente a través de la fisión binaria y se encuentran en ambientes de agua dulce, salobre y marinos.

Euglenas son un género de organismos eucariotas unicelulares con flagelos. Son cilíndricos con cloroplastos de color verde brillante en su interior. Se encuentran en aguas dulces y saladas. Aunque tienen la capacidad de realizar la fotosíntesis (como las plantas), también pueden alimentarse de otros organismos (como los animales).

Giardia lamblia es un organismo parasitario eucariota unicelular. La forma flagelada del parásito coloniza y se reproduce en el intestino delgado, provocando giardiasis. Giardia Los trofozoítos absorben sus nutrientes de la luz del intestino delgado y son anaerobios (no usan oxígeno). La infección humana se produce por ingestión de agua contaminada con la forma de quiste latente del parásito o por contaminación fecal-oral. La forma del quiste es muy resistente y puede sobrevivir durante semanas o meses en agua fría, y es resistente a la cloración. Giardia infecta a los seres humanos, pero también es uno de los parásitos más comunes que infectan a gatos, perros, ganado, ovejas y aves. El ciclo de vida comienza con la excreción de un quiste en las heces de una persona infectada. Una característica distintiva del quiste son cuatro núcleos. Una vez ingerido por un huésped, el trofozoíto emerge del quiste. Esta es la etapa activa del parásito capaz de alimentarse y moverse. Después de la etapa de alimentación, el trofozoíto sufre una replicación asexual a través de una fisión binaria longitudinal. Los trofozoítos y quistes resultantes luego pasan a través del sistema digestivo en las heces. Si bien los trofozoítos se pueden encontrar en las heces, solo los quistes pueden sobrevivir fuera del huésped.

DESPUÉS de haber completado sus pruebas de habilidad, examine cada una de las siguientes diapositivas y dibuje el organismo que observa a continuación.

4. Giardia quiste y trofozoíto


Parte II: Diámetro del campo

Los microscopios sirven para ampliar imágenes demasiado pequeñas para ser vistas a simple vista. Sin embargo, pueden usarse como una herramienta para estimar el tamaño del objeto que se está viendo. Para hacer esto, debe conocer el diámetro de cada campo de visión con cada lente objetivo. A continuación, puede estimar la cantidad de campo que ocupa su objeto en el campo y compararlo con el diámetro medido. Por ejemplo, digamos que el diámetro del campo con el objetivo de 40x es de 0,10 mm. Luego ve un objeto usando esa lente que ocupa & frac14 del campo de visión. A continuación, puede estimar que el objeto tiene & frac14 (0,10 mm) de largo o 0,025 mm. Para determinar el diámetro del campo, utilizará un portaobjetos micrométrico de platina, que es básicamente una regla muy fina (generalmente de 2 mm) que se graba en un portaobjetos de microscopio.

Figura 2. Micrómetro de escenario

Procedimiento

  1. Obtenga un portaobjetos micrométrico de escenario. TEN MUCHO CUIDADO. Un portaobjetos de micrómetro de escenario es costoso, ¡así que trátelo con respeto! Coloque el portaobjetos micrométrico de la platina en la platina y enfóquese en las marcas milimétricas usando la lente del objetivo de 10x. Registre el diámetro del campo en mm cuando utilice esta lente en la Tabla 3.
  2. Cambie al objetivo de 40x y enfoque. Determine el diámetro del campo en mm con el micrómetro y regístrelo en la tabla 3. Repita los mismos pasos para los otros objetivos.
  3. Convierta los diámetros a micrómetros (& muM). Todas las mediciones de células y orgánulos se realizarán en & muM. Limpie la diapositiva con cuidado y vuelva a colocarla en su bandeja en la mesa de demostración.

Ampliación total

Diámetro del campo (mm)

Diámetro del campo en (& microm)


Importancia de los estudiantes de microscopio

La historia de los microscopios tiene siglos. Los científicos romanos utilizaron "vasos ardientes" en sus guiones. Pero no fue hasta finales del 1300 que se fabricó el primer microscopio. Para la ampliación se utilizó un tubo simple con dos lentes colocados en extremos opuestos. Este tubo más tarde dio origen al microscopio moderno.

August Kohler tiene el mérito de haber inventado la iluminación uniforme del microscopio. Esto hizo posible la fotografía del espécimen.

Ernst Leitz ideó una forma de tener diferentes aumentos mediante el uso de múltiples lentes en un engranaje móvil en el extremo del tubo de la lente.

Durante algunas décadas, el uso de estos "lentes mágicos" se ha incrementado en las escuelas. Esta es una de las mejores herramientas para entusiasmar a los estudiantes con la ciencia. Los microscopios más comunes que se utilizan en las escuelas secundarias son los microscopios compuestos y binoculares. Un microscopio compuesto con un aumento de hormigón suele ser suficiente para las escuelas secundarias.

La biología es parte de las ciencias naturales. Es fundamental que su enseñanza sea a través del aprendizaje activo y la observación de las realidades biológicas. Muchas cosas no son visibles a simple vista que son valiosas para que los estudiantes las experimenten de primera mano y busquen a través del aprendizaje por descubrimiento. Como no se puede negar la importancia de aprender sobre los microorganismos, la estructura celular y los órganos, es vital acercar un microscopio para lograr este propósito. La microscopía es un método visual de aprendizaje y se puede utilizar para trabajos prácticos y métodos de demostración.

Los microscopios han llevado la ciencia a un nivel completamente nuevo. Los estudiantes pueden ver frente a sus ojos lo que estudian, las estructuras celulares, la existencia de microorganismos y pueden ver las partes más pequeñas de animales, plantas y hongos.

Es emocionante saber que la microscopía se aplica a muchas disciplinas, además de la ciencia, desde la química hasta la ciencia forense, desde las ciencias de la tierra hasta la física.

Los estudios de ciencias naturales deben involucrar el aprendizaje activo, la investigación y la revelación del mundo que nos rodea con pensamiento crítico. El aprendizaje pasivo proporciona a los estudiantes un conocimiento incompleto que es ineficaz e insatisfactorio. Por lo tanto, los maestros deben utilizar el aprendizaje activo y preparar actividades curriculares y extracurriculares para los estudiantes para una adopción más rápida y mejor y una educación innovadora.

El conocimiento científico temprano es esencial para los futuros científicos, así como para todos los demás. El uso de microscopios en las escuelas puede:

  • Proporcione aprendizaje práctico.
  • Promueva ver, hacer, cuestionar, pensar y discutir.
  • Ser utilizado para otras ramas de la ciencia.
  • Incrementa la curiosidad por buscar nuevos ejemplares.
  • Motivar a algunos estudiantes para que se conviertan en científicos.

La microscopía ayuda a aprender y memorizar hechos y cifras más fácilmente que el modo tradicional de enseñanza. Se puede decir que la forma antigua y tradicional de enseñar la ciencia ni suscita interés ni entusiasmo individual por la ciencia, ni produce el nivel mental para afrontar y triunfar en este mundo moderno dominado por la tecnología.

Cuando los estudiantes aprenden sobre el funcionamiento de microscopios, intentan relacionarlo con muchos otros aspectos del conocimiento y la creatividad. La microscopía enseña en dos niveles definidos: experiencia directa y conocimiento indirecto.

El conocimiento directo se trata de microscopios, diseño, características, preparación de muestras, etc. Se proporciona experiencia indirecta cuando se muestra cualquier imagen de cualquier otro tema educativo. Por lo tanto. La microscopía ayuda a aprender sobre muchos problemas.

¿Qué puede hacer la microscopía que los libros y los videos no puedan?

No basta con mirar. Los estudiantes deben aprender a ver, a intercambiar ideas, a discutir, a preguntar y a cuestionar. Hay al menos siete ventajas de la microscopía sobre la lectura de libros de texto:

  • Es un asunto práctico.
  • Es un uso simultáneo de ojos, manos y cerebro.
  • Es favorable para discusiones en el aula y sesiones de preguntas y respuestas. Los estudiantes pueden trabajar individualmente y en grupos.
  • En cambio, los estudiantes no aprenden hechos, aprenden a usar información visual, descubren el mundo invisible y aprenden a operarlo.
  • También se pueden utilizar binoculares y telescopios ampliando la óptica de un microscopio.
  • Los estudiantes pueden aprender sobre diferentes muestras junto con microscopios y óptica.
  • Los microscopios son herramientas de investigación además de divertidas de usar.

La educación en ciencia y tecnología es educación con microscopios. Sin microscopios, hay muchos logros que los estudiantes no podrán lograr.


Uso de un microscopio con estudiantes con impedimentos visuales

La semana pasada, en una de mis clases, un estudiante sin visión preguntó por qué necesitaba aprender a usar un microscopio. El microscopio óptico es una de las tecnologías más importantes desarrolladas para las ciencias de la vida, ya que fue fundamental en el descubrimiento de la célula y los microorganismos. Por lo tanto, a todos los estudiantes de biología se les debe enseñar la importancia científica histórica del microscopio a medida que aprenden cómo funciona. En respuesta a la pregunta planteada por mi alumno, le expliqué la importancia del microscopio e indiqué que proporcionaría modelos o líneas en relieve de imágenes que vemos bajo el microscopio. Este alumno ha resultado ser uno de los más implicados e interesados ​​ya que hemos estudiado la forma en que funciona el microscopio óptico.

¿Qué microscopio es mejor para estudiantes con baja visión?

Aunque pocos estudiantes con impedimentos visuales se benefician de utilizar un microscopio óptico directamente, muchos estudiantes con baja visión pueden beneficiarse de dispositivos que permiten que la imagen del microscopio se muestre en una pantalla en lugar de hacerlo a través del ocular del microscopio. El microscopio USB Celestron es uno de esos dispositivos que utilizo regularmente para biología. El microscopio específico que utilizo en clase es el microscopio digital Pentaview LCD. El microscopio está equipado con una pantalla pequeña, pero se puede conectar a un monitor grande para que los estudiantes con baja visión puedan verlo.

¿Cómo se puede hacer accesible el trabajo del microscopio a los estudiantes ciegos? & Lt

Los estudiantes ciegos deben recibir modelos o líneas en relieve de las imágenes que se muestran cuando los estudiantes con baja visión ven la imagen. Cell Zone es un recurso maravilloso que proporciona modelos 3D de algunas estructuras celulares.

Si está disponible, una impresora 3D es un recurso excelente para producir modelos, incluidos modelos de células vegetales, animales y bacterianas, así como virus. Obtenga más información sobre el uso de impresoras 3D para producir modelos virales.

El modelo celular que recomiendo son los modelos de células animales y vegetales 3B® de Carolina Biology Supply. También hay otros buenos modelos disponibles. Las estructuras que se encuentran dentro de la celda (orgánulos) a menudo se representan como dibujos en relieve en el libro de texto. Idealmente, el TVI (maestro de personas con discapacidad visual) también proporcionará modelos tridimensionales de los orgánulos. Un artista puede producirlos si el tiempo lo permite. (Por favor mira Colaboración con un artista para crear modelos científicos.)

A medida que se presenta el microscopio óptico a los estudiantes de ciencias biológicas de la escuela media y secundaria, también se les debe enseñar a los estudiantes con discapacidad visual las partes del microscopio y sus funciones. Esto se puede lograr de manera más efectiva al permitir que los estudiantes con discapacidad visual exploren el microscopio con el tacto mientras el instructor está enseñando. Idealmente, el TVI estará presente en esta lección. El TVI debe revisar las partes del microscopio antes de la lección. Si es posible, obtenga un microscopio más antiguo para que lo use el estudiante para que el estudiante no dañe accidentalmente el microscopio.


Microscopios electronicos

A diferencia de los microscopios ópticos, microscopios electronicos (EM) (Figura 1b) usa un haz de electrones en lugar de un haz de luz. Esto no solo permite una mayor ampliación (hasta 5 millones de veces con algunos EM especializados) y, por lo tanto, más detalles (Figura 2), sino que también proporciona un mayor poder de resolución. El método utilizado para preparar la muestra para su visualización con un microscopio electrónico mata la muestra. Los electrones tienen longitudes de onda cortas (más cortas que los fotones) que se mueven mejor en el vacío, por lo que las células vivas no se pueden ver con la mayoría de los microscopios electrónicos.

En un microscopio electrónico de barrido, un haz de electrones se mueve hacia adelante y hacia atrás a través de la superficie de una célula, creando detalles de las características de la superficie de la célula. En un microscopio electrónico de transmisión, el haz de electrones penetra en la célula y proporciona detalles de las estructuras internas de la célula. Como puede imaginar, los microscopios electrónicos son significativamente más voluminosos y costosos que los microscopios ópticos.

Figura 2. (a) Estos Salmonela las bacterias aparecen como pequeños puntos de color púrpura cuando se observan con un microscopio óptico. (b) Esta micrografía de microscopio electrónico de barrido muestra Salmonela bacterias (en rojo) que invaden las células humanas (en amarillo). Aunque la subfigura (b) muestra una diferencia Salmonela muestra que en la subfigura (a), aún puede observar el aumento comparativo en la ampliación y el detalle. (crédito a: modificación del trabajo de CDC / Armed Forces Institute of Pathology, Charles N. Farmer, Rocky Mountain Laboratories crédito b: modificación del trabajo de NIAID, datos de barra de escala de NIH de Matt Russell)


Aplicaciones del microscopio de fluorescencia

La microscopía de fluorescencia se usa ampliamente en microbiología de diagnóstico y en ecología microbiana (para enumerar bacterias en entornos naturales).

Muestra teñida con anticuerpos fluorescentes que muestra numerosos Toxoplasma sp. taquizoíto
(Crédito de la imagen: CDC)


Ver el vídeo: O BÁSICO SOBRE MICROTOMIA - Prof. Claudio Bernardazzi (Diciembre 2022).